細胞培養是一種常用的發酵工藝↟☁·,多采用攪拌式細胞發酵系統↟☁·,也可採用管式系統✘╃·₪。在發酵過程中↟☁·,不斷向發酵罐灌流培養液↟☁·,同時以相同流量流出✘╃·₪。灌流工藝的優點是可在發酵過程中不斷去除細胞碎片和副產物↟☁·,降低細胞死亡後釋放的各種酶類可能對產物的影響✘╃·₪。同時↟☁·,由於連續不斷的灌流新鮮培養液而提供一個較恆定的培養環境↟☁·,因此可獲得較高的單位體積產率✘╃·₪。由於灌流系統多采用細胞截留與回收系統↟☁·,因而可實現細胞的高密度發酵✘╃·₪。
細胞培養時各種新增物的具體作用╃▩₪✘•:
胰島素(Insulin↟☁·,貨號╃▩₪✘•:CSP001)作用廣泛↟☁·,包括調節脂肪和蛋白質的代謝以及促進細胞生長等✘╃·₪。胰島素功能的發揮源於其對細胞的作用↟☁·,進而引起組織乃至機體的整體反應✘╃·₪。一般可將胰島素在細胞水平的作用分為三大類╃▩₪✘•:代謝作用◕││☁╃、促生長作用◕││☁╃、以及代謝和促生長混合作用✘╃·₪。胰島素對細胞的代謝調節作用主要是透過其與細胞膜上的胰島素受體(Insulin receptor, IR)相互作用而介導↟☁·,而胰島素對細胞的促生長作用則是透過其與細胞膜上胰島素樣生長因子受體(IGF Receptor, IG)相互作用而介導的✘╃·₪。在無血清細胞培養液中↟☁·,常新增胰島素來維持細胞生長↟☁·,調節細胞對葡萄糖◕││☁╃、氨基酸和脂肪酸的攝取◕││☁╃、利用和貯存↟☁·,同時抑制糖原◕││☁╃、蛋白質和脂肪的分解✘╃·₪。
丙酮酸鈉(Sodium Pyruvate↟☁·,貨號╃▩₪✘•:CSP003)是常見的丙酮酸鹽↟☁·,是一類內源性小分子物質↟☁·,丙酮酸鈉和丙酮酸均是天然存在於人體內↟☁·,並參與全身各組織和器官的代謝✘╃·₪。丙酮酸鈉在醫學上◕││☁╃、診斷試劑以及醫療器械中被廣泛用作緩衝劑◕││☁╃、賦形劑和抗氧化劑✘╃·₪。在人體中行動中大多數細胞只利用葡萄糖作為能量的物質就夠了↟☁·,而在細胞培養中丙酮酸鈉是必須的物質✘╃·₪。丙酮酸鈉在培養基中起到替代碳源的作用↟☁·,參與細胞營養代謝✘╃·₪。Hep G2↟☁·,Caov-3及細胞培養基中就需要額外新增丙酮酸鈉↟☁·,以維持細胞良好的生長狀態✘╃·₪。