在細胞培養工作中•₪✘·,常需要了解細胞生活狀態和鑑別細胞死活•₪✘·,確定細胞接種濃度和數量以及瞭解細胞存活率和增殖度•₪✘·,如用酶消化製備的細胞懸液中細胞活力的鑑別•₪✘·,凍存細胞復甦後的活力檢測等◕╃◕。細胞懸液製備後•₪✘·,常用活體染料臺盼藍對細胞進行染色•₪✘·,進行細胞計數◕╃◕。準確的細胞計數對評估培養的細胞生長是至關重要•₪✘·,因為錯誤的計數會導致關於細胞健康的錯誤結論◕╃◕。細胞計數可以使用血球計數板··✘↟₪、自動計數器進行◕╃◕。細胞計數一般用血細胞計數板•₪✘·,按白細胞計數方法進行計數•₪✘·,便於確定細胞的生活狀況◕╃◕。
細胞生長的每個階段·•│▩:
停滯期·•│▩:細胞適應培養條件的階段•₪✘·,細胞在此階段不分裂◕╃◕。細胞通常在起始培養後的24小時內附著•₪✘·,該階段的總時長取決於培養之初使用細胞的生長階段和接種密度◕╃◕。
對數期·•│▩:細胞在此階段積極分裂•₪✘·,是評估群體生長和通用資料收集的時間◕╃◕。對數期的後期•₪✘·,過度擁擠導致細胞脅迫之前是傳代細胞(亞培養)的時機◕╃◕。
平穩期·•│▩:隨著細胞達到100%融合•₪✘·,細胞在此階段生長放緩•₪✘·,不足1/10的細胞處於活躍細胞週期◕╃◕。細胞在此階段容易受傷•₪✘·,因此需要小心觀察以確保細胞在此階段之前或之初進行傳代◕╃◕。
衰退期·•│▩:細胞週期的自然組成部分◕╃◕。在此階段•₪✘·,隨著細胞死亡佔據主導地位•₪✘·,活細胞群體數量減少◕╃◕。
細胞計數原理·•│▩:細胞懸液製備後•₪✘·,需要計算懸液中所含細胞數量;一般以細胞數/毫升表示◕╃◕。因只有健康的細胞才有活力•₪✘·,接種後能夠生長增殖•₪✘·,所以在接種應先檢查一下細胞的活力◕╃◕。